儀器及試劑:儀器為藥物粉碎機(jī)、分析天平、凱氏定氮儀(包括凱氏定氮蒸餾裝置和消化爐)、凱氏燒瓶。試劑為濃硫酸(AR級);50%氫氧化鈉溶液;硫酸鉀;硫酸銅;0.1mol/L鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液;甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑。本文我們采用GB/T5009.5—2003國際標(biāo)準(zhǔn)法來測定蛋白質(zhì)含量。
實(shí)驗(yàn)過程:將成熟后的枯黃的莖稈粉碎過篩后備用。去試樣0.500~2.000g準(zhǔn)確至0.0002g,放入凱氏燒杯中,加入10g無水硫酸鉀0.5g硫酸銅和20ml濃硫酸。和2粒玻璃珠,將凱氏燒杯置于電爐上加熱,開始小火,代樣品焦化,泡沫消失后,再火力直至呈透明的藍(lán)綠色,然后再繼續(xù)加熱,約2h;去出凱氏燒瓶加入約200ml蒸餾水,連接定氮蒸餾裝置,將餾出液出口的冷凝管下端插入盛有50ml含數(shù)滴甲基紅的01.mol/L標(biāo)液的三角燒瓶中,在凱氏燒瓶內(nèi)加入少許沸石緩緩加入80ml50%氫氧化鈉溶液,立即連接好定氮球,檢查整個(gè)定氮裝置是否漏氣,用直接火源加熱蒸餾,蒸餾至凱氏燒瓶內(nèi)殘?jiān)种粫r(shí),打開定氮球與凱氏燒瓶的塞口,停止加熱;1)用0.1000mol/LHCl標(biāo)液進(jìn)行滴定,移取樣品至錐形瓶中用0.1000mol/LHCl標(biāo)液進(jìn)行滴定,直至標(biāo)準(zhǔn)溶液由藍(lán)綠色變成灰紅色為終點(diǎn)。此時(shí)消耗鹽酸的量記為V2;2)空白實(shí)驗(yàn)取與消化樣品時(shí)同樣的量的硫酸銅、硫酸鉀、濃硫酸,按上述方法進(jìn)行消化、定容到100ml,的空白消化液,取同量空白消化液進(jìn)行蒸餾,用指示劑滴定至紅色消失為終點(diǎn)。此時(shí)消耗鹽酸的量記為V1。
結(jié)果計(jì)算:總氮量(%)=C*(V2-V1)÷1000×14.1/w;注C-鹽酸的摩爾溶液;V1-空白滴定消耗標(biāo)準(zhǔn)液的量(ml);V2-樣品滴定消耗標(biāo)準(zhǔn)酸液的量(ml);w-樣品的質(zhì)量;14.1-氮的摩爾質(zhì)量。蛋白質(zhì)(%)=總氮量%*K;K-氨轉(zhuǎn)換為蛋白質(zhì)的系數(shù)取5.7。
結(jié)論:從我們的的實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),這批青稞秸稈蛋白質(zhì)含量較低,平均為1.482,與作為飼料時(shí)蛋白質(zhì)含量在2-8%之間還有一定的差距。因此直接將青稞秸稈作為飼料是不合理的,因?yàn)槠涞鞍踪|(zhì)含量低、質(zhì)地粗硬,適口性差且不易消化和吸收,但是秸稈中含有70%的碳水化合物和植物光合作用所積累的一半能量,且分布廣泛,競爭性用途少,開發(fā)利用潛力很大。
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